品名 | 规格 | 包装 | 单价 | 货期 |
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒 | 1000微孔(100T) | 462元 | 现货 |
Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
操作说明:
1.根据需要量,取适量Folin酚甲试剂A和B按50:1混合,混合后有效期为24小时,过期失效。
2.根据需要量,取适量BSA标准品用PBS稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。
若采用酶标仪法(96孔)
3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul加到96孔板中,加PBS补足到20ul。
4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),加20ul到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
5.将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200ul,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。
6.各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法(接上述步骤2)
3.取八支(或者更多)5ml离心管,标号,按下表加入试剂。
4.混匀,37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。
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