台盼蓝染色液
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产品简介:
台盼蓝(Trypan Blue) 或称台盼兰、锥虫蓝,是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性与细胞的存活率,是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。 正常的活细胞细胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,细胞不会被染成蓝色;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。染色时间只需3-5 分钟,操作简单。
使用说明:
1. 收集细胞:
用胰酶和/ 或EDTA 消化贴壁细胞,悬浮细胞可直接收集。收集的细胞时用 1000-2000 rpm离心1 分钟,弃上清,制备单细胞悬液,并做适当稀释。
2. 台盼蓝染色:
细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以 9:1 比例混匀(终浓度 0.04% ),染色 3 分钟 ( 染色3 分钟时间已经足够,但染色时间可以更长一些,但不宜超过10 分钟) 。
3. 细胞计数:
吸取少量经过染色的细胞,用血细胞计数板计数。死细胞着蓝色并膨大,无光泽;活细胞不着色并保持正常形态,有光泽。通常要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500 个细胞。 细胞存活率(% )= 活细胞总数/ (活细胞总数+ 死细胞总数)×100%
注意事项:
1. 染色时间不能太长,否则活细胞也会逐渐积累染料而染成颜色,使检测结果偏低;
2. 有潜在致癌危险,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
贮存:
4 ℃保存, 一年有效。
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