一种基于结构从大黄苄叉丙酮合成酶机制

一种基于结构从大黄苄叉丙酮合成酶机制。

 

Hiroyuki Morita，Yoshihiko下川，michikazu tanio，王志加藤，博野，shigetoshi sugio，Toshiyuki Kohno，ikuro安倍

 

发表于20080733

 

摘要

 

苄叉丙酮合成酶（BAS），植物特有的III型聚酮合成酶（PKS），催化一步脱羧缩合丙二酸单酰辅酶A和4-香豆酰-CoA产生diketide苄叉丙酮。我们解决了两个野生型和查尔酮生产大黄BAS i207l / l208f突变在1.8分辨率的晶体结构。此外，我们解决了野生型酶的晶体结构，其中一个monoketide香豆酸中间体共价催化半胱氨酸残基，在1.6分辨率。这是第一个直接证据，Ⅲ型PKS利用半胱氨酸作为亲核试剂和作为聚酮中间体的附着位点。晶体结构显示，BAS利用一个替代，新的活跃站点口袋锁定香豆酸的芳香基团，取代查尔酮合成酶的香豆酰基结合口袋，这是迷失在野生型酶的活性位点和恢复的突变体i207l / l208f。此外，晶体结构表明，一个水分子的亲核的Cys-His的天冬酰胺催化三联形成氢键网络的存在。这表明，BAS采用酶结合的diketide中间和最终的脱羧反应产生的硫酯键裂解苄叉丙酮催化机械。这些结果为III型PKS酶的功能多样性的结构提供了依据。

 

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